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在大型法兰生产中，影响大型法兰的性能因素有很多，下面我们说下常见的几个因素，首先是退火温度（退火温度为引物和模板结合时候的温度参数，当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度·它是影响PCR特异性的较重要因素。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的 Tm低5℃。
）是否达到规定温度Annealing temperature reaches the required temperature。大型法兰处理一般是采取固溶热处理，也就是人们平常所谓的“退火”，温度范围为1040~1120℃（日本标准）。你也可以通过退火炉观察孔观察，退火区的大型法兰管件应为白炽状态，但没出现软化。
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